干货！流式细胞术中小鼠特有细胞的标志物如何选择？

F4/80，也被称为EMR1或Ly71，是小鼠中常用的巨噬细胞标志物。它广泛表达于多种成熟的巨噬细胞类型，包括肝脏的Kupffer细胞、朗格汉斯细胞、小神经胶质细胞，以及位于腹腔、肺、肠道、胸腺、脾脏红髓和骨髓基质中的巨噬细胞。

F4/80是成熟小鼠巨噬细胞的标志物，在流式细胞术检测中，使用F4/80+CD11b+可以有效区分其他类型的单核细胞。

以下是检测结果的示例图：

CD16是低亲和力的IgG Fc受体III（FcR III），而CD32是Fc受体II（FcR II）。它们能够结合抗体-抗原免疫复合物，从而参与调节适应性免疫应答。CD16和CD32在多种免疫细胞上表达，包括B细胞、单核细胞/巨噬细胞、自然杀伤（NK）细胞、粒细胞、肥大细胞和树突状细胞等。

在检测小鼠样本时，可以使用纯化的小鼠CD16/32单克隆抗体作为Fc受体封闭剂。通常情况下，在100 μL的反应体系中，106个细胞，加入0.5-1 μg的纯化抗小鼠CD16/32抗体，在室温下孵育10分钟即可有效封闭小鼠的Fc受体。

如下图所示：

CD49b和NK1.1是小鼠NK细胞鉴定的常用标志物。在实验中，根据小鼠品系的不同，需要选择其中一个作为标记。用于标记小鼠的自然杀伤细胞（NK细胞）。NK1.1是小鼠特有的自然杀伤细胞标记物，在研究免疫细胞功能时常用来区分NK细胞。例如，BALB/c小鼠通常使用CD49b（DX5）作为NK细胞标记，而C57BL/6小鼠则使用NK1.1。分析时，可以通过标记CD3-CD49b+（对于BALB/c小鼠）或CD3-NK1.1+（对于C57BL/6小鼠）来识别NK细胞。

下图展示了C57BL/6小鼠NK细胞的流式检测结果：

小鼠的CD90蛋白由两个等位基因编码，分别为Thy1.1（CD90.1）和Thy1.2（CD90.2）。这两者的主要区别在于第108位氨基酸的差异。CD90（也称为Thy-1）广泛表达于造血干细胞、神经元、所有胸腺细胞以及外周T细胞上。不同小鼠品系的CD90表达有所不同：表达CD90.1的品系包括AKR、BDP、MA/MyJ等；而CD90.2则在更多品系中表达，如BALB/c、CBA/J、C3H/He、C57BL/6、DBA、NZB等。在实验研究中，CD90.1和CD90.2常用于供受体之间的细胞过继转移实验，帮助研究细胞的增殖、分化及分布等特征。

小鼠的CD45蛋白由两个等位基因编码，分别为CD45.1和CD45.2。这两个等位基因的主要区别在于它们所表达的异构体。表达CD45.1的小鼠品系包括FVB、RIII、SJL/J、STS/A、DA等；而CD45.2则在更多小鼠品系中表达，如AKR、BALB/c、CBA/Ca、CBA/J、C3H/He、C57BL、C57BR、C57L、C58、DBA/1、DBA/2、NZB、SWR、129等。在实验研究中，CD45.1和CD45.2常用于进行供受体之间的细胞过继转移实验。这种方法能够有效区分不同来源的细胞，并帮助研究细胞的增殖、分化及分布等特征。