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【技术分享】细胞培养基础——环境保持(一)

2014 人阅读发布时间:2019-08-02 15:17

【技术分享】细胞培养基础——环境保持(一)

相信很多新手朋友都会遇到这种情况,自己培养的细胞本来好好的,突然有一天细胞培养基浑浊了、变黄、飘着一些霉菌团或者显微镜下全是树枝状的霉菌菌丝。起初还只是一两个培养瓶有这种情况,过段时间就出现大面积污染了。出现以上情况的时候,很多刚开始接触细胞培养的人都不知道是怎么污染的,更不知道如何处理。接下来,小编就分享自己的经验,如何从环境上降低细胞被污染的概率。

【技术分享】细胞培养基础——环境保持(一)

首先我们知道,造成细胞污染的污染物不是凭空产生的,而是环境或者人为带入的。那么我们就要从环境和人员两个方面入手,看看具体要注意哪些事项吧!


细胞室设计

可别小看细胞室设计这一点,很多实验室长期出现污染都与这个有很大关系。


1. 细胞室应设计合理的通风、缓冲区域

细胞室的空气要保持清洁,需要对流入的空气进行过滤,防止外界污染通过空气传播。人员进入细胞室,需要经过缓冲室,缓冲室的作用就是避免开门进出时外界的空气直接与细胞室内流通;同时还有另外一个功能,人员穿戴实验服、防具的可以在这里进行,可以避免人体身上灰尘、皮屑等直接进入细胞室。

 
2. 细胞室位置避免阳光直射、隔离水源、通风良好

我们目前培养的细胞大部分都是37摄氏度条件下培养,固细胞培养箱的正常使用需要室内气温保持在37度以下,甚至部分国产培养箱需要保持室温30度以下才能正常工作。因此避免阳光直射,不仅可以直接降低细胞室夏季的空调费用,而且在其它季节也可以避免因暴晒导致培养箱体高温;隔离水源可以避免水池里滋生的各种细菌、真菌等,降低实验室污染概率,切忌图方便将水源引入细胞室,否则管理不善的话很容易出现各种污染的情况;细胞室需要经常保持通风,通风可以降低空气湿度,尤其是南方梅雨季节,降低空气湿度可以减少霉菌滋生的情况。

 
3. 细胞室超净台、生物安全柜应摆放合理

超净台、安全柜都是通过过滤空气来防止污染的,所以彼此之间应留出一定空间,避免出现互相吹风,影响各自工作的情况。

【技术分享】细胞培养基础——环境保持(一)
 
人员装备

人员装备可以有效的防止人体自身携带的污染物污染细胞,同时也能为实验者提供可靠的防护。

1. 进入细胞室必须换鞋,穿戴实验服、手套、口罩

细胞室是洁净的环境,而人体自身会携带诸多污染物进入实验室。换鞋,穿戴实验服、手套、口罩可以很大程度上避免沾染的泥土、灰尘、皮屑、毛发、口腔细菌、支原体所致的污染。

 
2. 实验服、手套、口罩可以给实验者提供防护

有部分细胞是会表达一些病毒的,而且很多细胞都是人体瘤细胞,相信实验者都不想直接接触这些细胞,那么合理使用人员防护道具可以避免直接接触细胞,降低实验者心理压力。


环境维持
【技术分享】细胞培养基础——环境保持(一)

有合理设计的实验室,合理使用人员装备还不够,还需要定期对环境进行维护,扫除漏网之鱼。

1. 细胞室应定期紫外消毒

细胞室内应在固定位置安装紫外杀菌灯,通过紫外、臭氧双重作用杀灭可能存在的污染物,保持环境洁净。最好有定时开关,每天晚上人离开实验室后,对实验室进行1-2h的紫外杀菌。

 
2. 培养箱应定期清洗消毒

培养箱是至关重要的一环,一旦污染,不加控制的话,势必造成大面积污染的情况。培养箱建议1-2周换水一次,2-3个月进行一次清洗、整体消毒。如果平时污染比较严重的话,可以缩短消毒周期,避免长时间使用导致污染累积爆发。

 
3. 超净台、安全柜每次使用后应擦净台面、紫外照射

使用后用75%酒精棉擦干净台面,可以保持台面清洁,美观。使用超净台前,一定要紫外杀菌半小时方可开始实验。


4. 细胞室地面应定期用消毒液拖地

地面是污染物聚集最严重的地方,需要经常用84消毒液拖地,保持地面清洁。


5. 各种台面、冰箱内部定期清洗消毒

这些地方也是容易藏污纳垢的地方,一定要经常用75%酒精擦洗干净,保持清洁。

 

好了,今天分享的细胞培养经验就到此为止,后期我们会推送更多技术经验文章,请持续关注哦!关于细胞有其它疑难问题,欢迎广大小可爱们下方留言交流;或者有小可爱想知道哪方面的经验,也可以留言建议,我们会将这些建议和问题归纳整理出来,后期发布推送。咱们下期再见

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